SET AIE

Nr. crt.	Component	Cantitate pentru 125 teste	Cantitate pentru 185 teste	Cantitate pentru 250 teste	Cantitate pentru 370 teste
1.	Antigen AIE (liofilizat)	1 fl. X 2 ml	1 fl. X 2,7 ml	2 fl. X 2 ml	2 fl. X 2,7 ml
2.	Ser pozitiv AIE (liofilizat)	1 fl. X 5,4 ml	2 fl. X 5,4, ml	2 fl. X 5,4 ml	3 fl. X 5,4 ml
3.	Diluant	1 fl. X 10 ml	2 fl. X 10 ml	2 fl. X 10 ml	3 fl. X 10 ml
4.	Instrucțiuni de utilizare	1 ex	1 ex	1 ex	1 ex

 

MOD DE UTILIZARE:

I. Testul de imunodifuzie se execută în gel de agar 1% preparat în tampon borat (NaOH 2 g; H3 BO3 9 g; apă distilată 1000 ml), pH= 8,6, repartizat câte 17 ml în plăci Petri cu diametrul de 100 mm. Înainte de folosire se verifică dacă nu este prea uscat sau dacă nu este acoperit de condens.

II. În agarul întărit suficient se practică godeuri (Fig.1), folosindu-se o matriță cu 7 godeuri (1 central și 6 periferice), diametrul godeului este de 5,3 mm și distanță între godeuri de 2,4 mm (OIE, Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines, rev. 2011, cap. 2.5.6).

  Înainte de umplerea godeului, dacă este cazul, se îndepărtează lichidul de condensare.

III. Distribuirea reactanților este următoarea (Fig.2):

- în godeul central: antigenul (fiecare flacon solubilizat în 2 ml diluant pentru

125/250 teste sau în 2,7 ml diluant pentru 185 / 370 teste);

- în godeurile 1, 3 și 5 serul pozitiv (fiecare flacon solubilizat în 5,4 ml diluant);

- în godeurile 2, 4 și 6 serurile de testat.

  Godeurile sunt umplute complet și uniform cu o cantitate de 43 µl/godeu pentru fiecare din reactanții utilizați.

  Plăcile sunt lăsate câteva minute pe masa de lucru, după care sunt incubate la

23-25ºC într-o camera închisă și umedă.

INTERPRETAREA REACŢIEI:

Citirea se face la 24, 48 și 72 de ore de la punerea în contact a reactanților.

Intensitatea reacției variază în funcție de concentrația anticorpilor existentă în serurile de testat.

Reacția se interpretează comparativ cu reacția dintre serul martor pozitiv și antigenul setului de diagnostic.

Se pot întâlni următoarele situații:

A. REACŢII NEGATIVE (Fig.3)

Linia de precipitare de control atinge godeul probei de testat fără a se arcui.

Serurile de testat nu dau linii de precipitare cu antigenul AIE din set.

B. REACŢII POZITIVE (Fig. 4)

Linia de precipitare de control se unește cu linia dată de serul de testat și antigenul din set formând o linie continuă

C. REACŢII SLAB POZITIVE (Fig. 5)

Linia de precipitare de control este ușor arcuită formând o linie tangentă sau aproape tangentă la godeul cu proba de testat.

Pentru confirmarea diagnosticului se impune repetarea reacției.

D. REACŢII INTENS POZITIVE (Fig. 6)

Linia de precipitare de control se continuă aproape de godeul central cu o linie de precipitare groasă și difuză dată de reacția dintre antigen și proba de testat.

Se recomandă testarea serului în diluțiile 1/2 - 1/4 situație în care se evidențiază o linie de precipitare clară și distinctă.

MATERIALE NECESARE CARE NU SUNT FURNIZATE ÎN TRUSĂ:

- pipete monocanal reglabile (pentru 43 µl)

- agar

- plăci Petri cu diametrul 100 mm

- tampon borat pH 8,6

- matrița pentru realizarea godeurilor in gelul de agar

- sticlărie de laborator

- incintă termostatată 23-25ºC

CONSERVARE:

Setul AIE se păstrează la 2-8ºC.